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近紅外活體成像系統(tǒng)觀察哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育的意義
更新時(shí)間:2022-03-01瀏覽:921次
近紅外活體成像系統(tǒng)是在不損傷動(dòng)物的前提下對(duì)其進(jìn)行長(zhǎng)期縱向研究的技術(shù)之一。成像技術(shù)可以提供的數(shù)據(jù)有絕對(duì)定量和相對(duì)定量?jī)煞N。在樣本中位置而改變,這類技術(shù)提供的為絕對(duì)定量信息,如CT、MRI和PET提供的為絕對(duì)定量信息;圖像數(shù)據(jù)信號(hào)為樣本位置依賴性的,如可見光成像中的生物發(fā)光、熒光、多光子顯微鏡技術(shù)屬于相對(duì)定量范疇,但可以通過嚴(yán)格設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)定量。其中可見光成像和核素成像特別適合研究分子、代謝和生理學(xué)事件,稱為功能成像;超聲成像和CT則適合于解剖學(xué)成像,稱為結(jié)構(gòu)成像,MRI介于兩者之間。
體內(nèi)可見光成像包括生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因標(biāo)記DNA,利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應(yīng)底物發(fā)生生化反應(yīng)產(chǎn)生生物體內(nèi)的光信號(hào);而熒光技術(shù)則采用熒光報(bào)告基因(GFP、RFP)或熒光染料(包括熒光量子點(diǎn))等新型納米標(biāo)記材料進(jìn)行標(biāo)記,利用報(bào)告基因產(chǎn)生的生物發(fā)光、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的生物光源。前者是動(dòng)物體內(nèi)的自發(fā)熒光,不需要激發(fā)光源,而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)。
哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育是一個(gè)動(dòng)態(tài)復(fù)雜的過程,既往研究方法包括組織染色、超聲、OCT(光學(xué)相干斷層成像)、MRI(磁共振成像)等,但是均不能在細(xì)胞水平上觀察胚胎發(fā)育的動(dòng)態(tài)過程。
利用近紅外活體成像系統(tǒng),我們?cè)谵D(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)觀察到了神經(jīng)遞質(zhì)傳遞、大腦形成早期神經(jīng)嵴細(xì)胞分化的血管周細(xì)胞、視網(wǎng)膜發(fā)育過程中的細(xì)胞自噬、腺病毒遞送以及胎盤熒光化學(xué)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)等。通過與子宮內(nèi)電轉(zhuǎn)技術(shù)結(jié)合在大腦中標(biāo)記特定細(xì)胞,觀察了細(xì)胞分裂及遷移。在同一人鼠嵌合體中追蹤了人神經(jīng)嵴細(xì)胞和鼠神經(jīng)嵴細(xì)胞的嵌合差異。
通過構(gòu)建人鼠嵌合體,還可以對(duì)人類干細(xì)胞及前體細(xì)胞進(jìn)行研究。